Главная >> Медицинские статьи >> Онкология

Мониторинг эффективности иммунотерапии при раке молочной железы

Е.Н. Куспаев
Западно-Казахстанская государственная медицинская академия им. Марата Оспанова, г.Актобе.
Развитие опухолевого процесса, в частности рака молочной железы, сопровождается выраженными нарушениями практически всех звеньев иммунитета, а применяемые специальные методы лечения в онкологической практике приводят к угнетению кроветворения, развитию лейко- и лимфопении [1,2,3]. Исходя из этого, оценка иммунологического состояния онкологического больного является крайне необходимым для проведения целенаправленной коррегирующей терапии. Среди средств, используемых с целью иммунотерапии особое место занимают препараты природного происхождения. По данным И.М.Омаровой [2,4], Е.И.Саканян с соавт. [5] препараты из корня солодки оказывают иммуномодулирующее и мембранопротекторное действие на клеточные, гуморальные звенья иммунитета и структуру мембран лимфоцитов. Глицирризиновая кислота, входящая в состав корня солодки, усиливает образование интреферона, поэтому иммуномодулирующее действие препаратов солодки относится ко всем звеньям иммунной системы [6]. Формирование и прогрессирование рака молочной железы (РМЖ) вызывает серьезные изменения в иммунном ответе, с которыми самостоятельно иммунная система не справляется и включение иммуномодуляторов в комплекс лечения онкологических больных является оправданным. При этом, самым сложным вопросом является правильная оценка действия лекарственных средств на разные звенья иммунной системы организма.
Цель исследования: изучение основных показателей иммунологической защиты у больных раком молочной железы при проведении коррегирующей терапии.
Материал и методы исследования. Исследованы иммунологические показатели периферической крови и регионарных лимфоузлов у 68 больных II и III стадиями РМЖ.
Первую группу составили 23 больных, которые получали стандартное лечение – химиотерапию по схеме CAF (циклофосфан, доксорубицин, 5-фторурацил) или CMF (циклофосфамид, метотрексат, 5-фторурацил), лучевую терапию РОД 2 Грея, СОД 40 Грей, с последующим оперативным лечением. Предоперационная химиолучевая терапия проводилась в среднем в течение 2 месяцев.
Вторую группу составили 12 больных, у которых на фоне стандартного лечения развилась лейкопения II степени, что вызвало необходимость проведения стимуляции лейкопоэза. С момента выявления у больных лейкопении назначалось комплексное лечение (преднизолон 1 мг/кг – однократно; в течение 5 дней - аскорбиновая кислота 5% - 5 мл, Вит В1, В6, деринат 5 мл в/м, Т-активнин (или тималин) – традиционная схема стимуляции лейкопоэза.
Третью группу составили 33 больных, которым к стандартной схеме лечения дополнительно назначали «Масло солодки» по 5 мл 3 раза в день, до операции, в среднем в течение 2 месяцев.
Контролем служили иммунологические показатели здоровых людей (доноры).
Для оценки состояния клеточного иммунитета использованы наборы моноклональных и поликлональных антител для определения дифференцированных антигенов лейкоцитов человека методом иммунофлюорисценции. Определялись следующие субпопуляции лимфоцитов: CD3, CD 4, CD 8, CD16, CD 20. Оценивали уровень содержания сывороточных иммуноглобулинов A, M, G методом радиальной иммунодиффузии по Маnchini. Функциональная активность Т- и В- лимфоцитов определялась в реакции бластной трансформации с неспецифическими митогенами. Изучали фагоцитарную активность нейтрофилов определением процента и индекса фагоцитоза [7].
Для определения функционального состояния лимфатических узлов использовали метод локального гемолиза [8], на основании которого оценивали показатели общего количества лимфоидных клеток (ОКЛК), количество живых лимфоидных клеток (ЖЛК), процент жизнеспособности лимфоидных клеток (ПЖЛК), количество функционально активных (антителобразующих) клеток (АОК).
Результаты исследований: Проведение предоперационной химиолучевой терапии (ХЛТ) привело к снижению количества лимфоцитов всех субпопуляций, только количество Т-супрессоров осталось на повышенном уровне, а в некоторых случаях продолжало нарастать, что по нашему мнению обусловлено повышением выброса супрессивных факторов опухолевой массой. В таблице 1 представлены показатели клеточного звена иммунитета при поступлении больных в онкохирургическое отделение после неоадъювантной ХЛТ.

Таблица 1 – Влияние иммуностимулирущих препаратов на показатели клеточного звена иммунитета у больных раком молочной железы на фоне проведения химиолучевой терапии

Группы
Показатели Контроль (n=50) ХЛТ
(n=23) ХЛТ+ традиц. иммуностимуляция (n=12) ХЛТ+ “Масло солодки” (n=33)
CD 3 (х10⁹/л) 1,1±0,04 0,83±0,01^# 0,87±0,01*^# 0,82±0,02^#
CD4 (х10⁹/л) 0,4±0,03 0,28±0,01^# 0,31±0,01*^# 0,29±0,01^#
CD8 (х10⁹/л) 0,2±0,02 0,26±0,01^# 0,27±0,01^# 0,25±0,01^#
CD16 (х10⁹/л) 0,3±0,01 0,24±0,01^# 0,26±0,01^# 0,25±0,01^#
CD4/ CD8 1,5-2,5 1,08±0,03^# 1,15±0,06^# 1,16±0,05*^#
^#р<0,05 (по сравнению с контрольной группой)
*р<0,05 (по сравнению с группой больных получивших ХЛТ)

Как видно из представленной таблицы больные 1 группы поступают на оперативное лечение с выраженными иммунологическими нарушениями, показатели цитотоксических субпопуляций клеточного звена иммунитета снижены (CD4 на 30%, CD16 на 20%). Применение стимуляторов лейкопоэза во 2 группе вызвало достоверное увеличение количества CD3 и CD16. Применение «Масла солодки» не привело к статистически достоверному изменению показателей клеточного звена иммунитета, однако при этом отмечается тенденция к увеличению цитотоксических и снижению супрессорной субпопуляций лимфоцитов, что привело к достоверному увеличению иммунорегуляторного индекса супрессии. Однако, проведение иммуностимулирующей терапии не вызывало нормализации показателей клеточного звена иммунитета.
Таблица 2 – Влияние иммуностимулирущих препаратов на показатели гуморального звена иммунитета у больных раком молочной железы на фоне проведения химиолучевой терапии
Группы
Показатели Контроль (n=50) ХЛТ
(n=23) ХЛТ+ традиц. иммуностимуляция (n=12) ХЛТ+ “Масло солодки” (n=33)
CD 20 (х10⁹/л) 0,4±0,03 0,34±0,01^# 0,37±0,01* 0,35±0,01^#
Jg A (г/л) 2,3±0,5 1,6±0,04^# 1,9±0,03* 1,9±0,07*
Jg M (г/л) 1,3±0,5 1,06±0,03 1,10±0,07 1,14±0,06
Jg G (г/л) 12,7±2,8 18,9±0,7^# 18,4±0,9^# 16,2±0,9*^#
^#р<0,05 (по сравнению с контрольной группой)
*р<0,05 (по сравнению с группой больных получавших ХЛТ)

У больных РМЖ после химиолучевой терапии выявлено снижение количества В- лимфоцитов на 6%, повышение уровня иммуноглобулина G на 49%, дисиммуноглобулинемия (табл. 2). Традиционная иммуностимуляция вызывала достоверное увеличение количества В- лимфоцитов, дисбаланс иммуноглобулинов при этом сохранялся. Применение «Масла солодки» способствовало снижению уровня иммуноглобулина G и уменьшению дисиммуноглобулинемии.

Таблица 3 – Влияние иммуностимулирущих препаратов на показатели функциональной активности лимфоцитов и фагоцитоза на фоне проведения химиолучевой терапии

Группы
Показатели Контроль (n=50) ХЛТ
(n=23) ХЛТ+ традиц. иммуностимуляция (n=12) ХЛТ+ “Масло солодки” (n=33)
РБТЛ ФГА (%) 22,4±1,22 16,7±0,02^# 16,1±0,03^# 16,9±0,8^#
РБТЛ ЛПС (%) 13,1±1,08 10,9±0,1^# 10,8±0,3 10,5±0,5^#
Процент фагоцитоза 60-72 42,8±1,0^# 40,8±1,1^# 45,1±1,5*^#
Индекс фагоцитоза 8,1-12,6 4,4±0,2^# 4,1±0,4^# 5,6±0,7*^#
^#р<0,05 (по сравнению с контрольной группой)
*р<0,05 (по сравнению с группой больных получивших ХЛТ)

После проведения химиолучевой терапии у больных РМЖ (табл. 3) отмечается снижение процента фагоцитирующих нейтрофилов на 29%, индекса фагоцитоза на 46%. У больных 2-ой группы, стандартная иммуностимулирующая терапия не привела к статистически достоверному изменению показателей фагоцитоза и функциональной активности лимфоцитов. Применение «Масла солодки» увеличило фагоцитоз, однако показателей контрольной группы они не достигли.
Обязательным этапом радикального лечения онкологического больного является удаление лимфатического коллектора, регионарного к опухолевому процессу. При изучении лимфоколлектора подмышечной области у больных РМЖ выявлены значительные нарушения функциональных показателей (таблица 4).

Таблица 4 – Влияние иммунотерапии на иммунофункциональные показатели регионарных лимфоузлов (в 20 мг лимфоузла)
Показатели ХЛТ
(n=95) ХЛТ+ традиц. иммуностимуляция (n=64) ХЛТ+ “Масло солодки” (n=141)
ОКЛК (млн) 6,8±0,7 9,6±1,3* 13,9±1,1*
ЖЛК (млн) 1,7±0,12 3,0±0,48* 6,1±0,46*
ПЖЛК (%) 24,9±2,9 31,5±4,2 44,8±3,3*
АОК 5,61±0,47 5,35±1,7 13,0±2,41*
ОКЛК – общее количество лимфоидных клеток, ЖЛК – количество живых лимфоидных клеток, ПЖЛК – процент жизнеспособности, АОК – количество функционально активных (антителобразующих) клеток
*р<0,05 (по сравнению с группой больных получивших ХЛТ)
Проведение ХЛТ вызывает снижение количества живых и функционально активных лимфоидных клеток в лимфоузле, ослабляя регионарный противоопухолевый барьер Применение традиционной иммуностимуляции увеличило общее количество, и повысило количество живых ЛК, функциональная активность при этом, статистически достоверно не изменилась. У больных принимавших «Масло солодки» общее количество, количество живых и функционально активных ЛК повысилось и увеличился процент их жизнеспособности.
Иммунная система показала высокую чувствительность как к проводимой ХЛТ, так и к иммунотерапии. Динамика изменений иммунологических показателей клеточного, гуморального звеньев иммунитета, фагоцитоза и регионарного лимфоколлектора зависела от вида проводимой терапии. Поэтому для комплексной оценки эффективности препаратов, действующих на иммунную систему, необходимо проводить мониторинг всех показателей.
Выводы. 1. Проведение комплексной иммуностимуляции при развитии выраженной лейкопении у больных раком молочной железы, приводит к увеличению количества лимфоцитов в крови и регионарном лимфоузле. Происходит повышение всех субпопуляций лимфоцитов, не сопровождаясь изменением функциональной активности, иммунологический дисбаланс сохраняется.
2. «Масло солодки» при раке молочной железы предупреждает развитие лейко- и лимфопении, уменьшает иммунный дисбаланс и увеличивает количество жизнеспособных и функционально активных лимфоидных клеток регионарных лимфоузлов.
3. При проведение иммунотерапии необходимо учитывать динамику изменений всех иммунологических составляющих противоопухолевого иммунитета. В частности, в онкологической практике появилась возможность дать оценку эффективности иммунотерапии через изменение морфофункционального состояния регионарного лимфоколлектора.

Литература.
1. Тимофеева М.Е., Алимходжаева Л.Т., Атабекова К.Ю. и др. Состояние противоопухолевого иммунитета в мониторинге эффективности лечения местно-распространенного рака молочной железы// Мат. I Конгресса онкологов РУз. «Актуальные проблемы онкологии». Ташкент, 2005, С.445-446.
2. Омарова И.М. Влияние химиотерапии на состояние иммунной системы больных раком молочной железы // Медицина, 2004, №1, С.110-112.
3. Rosen’s Breast Pathology. P.P.Rosen. Philadelphia: Lippincott Williams and wilkins, 2001, 1004 p.
4. Омарова И.М. Применение фитотерапии масляными экстрактами крапивы и солодки для профилактики осложнений химиотерапии // Сб научн. тр. V междун. конфер. «Здоровье, труд, отдых в XXI веке». Москва, 2002, С. 188-190.
5. Саканян Е.И., Кабишев К.Э. Применение препаратов солодки с целью корреции иммунного статуса// Terra medica nova, №2 (34), 2004 С. 37-39.
6. Shinada M., Azuma M., Kawai H. et al. Enhancement of interferon – gamma production in glycyrrhizin – treated human peripheral lymphocytes in response to concanavalin A and surface antigen of hepatatis B virus// Proc. Soc. Exp. Biol.Med., 1986, 181, P. 205-210.
7. Засорин Б.В. Иммуно- экологические исследования здоровья населения в зонах антропогенного загрязнения тяжелыми металлами// Методические рекомендации, Актобе, 1992, С.15-22.
8. «Иммунологические методы» под редакц. Г.Фримеля, перевод с немецкого А.П. Тарасов, Москва «Медицина», 1987. С.57-72.

Monitoring to efficiency immunoterapy at patients with breast cancer.
E.N.Kuspaev
Development of the breast cancer is accompanied expressed breaches all immunological section, and undertaking chemoradiation therapy brings about oppression haematologic indeces, reduction lymph and leukocyte. The influence immunological indeces of 68 patints with breast cancer on background the two schemes immunotherapy was studied. Immunological system has shown high sensitivity as to conducted chemoradiation therapy, so and to immunotherapy. The dynamics of the change different immunological section, phagocytosis and regional lymphocollector depended on type conducted therapy.

Сведения об авторах:
Куспаев Ержан Нургалиевич – соискатель кафедры онкологии ЗКГМА им Марата Оспанова.

18.11.2006